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島津液相色譜儀的日常應(yīng)用維護(hù)

島津液相色譜儀的日常應(yīng)用維護(hù)

一 、津掖相色譜儀的日常分析注意事項(xiàng)

1．關(guān)于試劑
試劑類別：有機(jī)溶劑 無機(jī)化合物 水
試劑的要求：（1）有機(jī)溶劑的級(jí)別HPLC以上試劑。
（2）無機(jī)化合物要求分析純以上。
（3） 水要求是去離子純凈水。

2．流動(dòng)相
要求： （1）無氣泡，通過超聲脫氣，通氦氣等方法進(jìn)行脫氣。
（2）純凈無雜質(zhì)，常用方法為用0.45微孔過濾膜進(jìn)行過濾。

3． ODS柱的注意事項(xiàng)
（1） 壓力 注意每根柱的耐壓（zui大使用壓力）。
（2） PH的范圍 不同柱子的PH值范圍有所不同。
（3） 清洗 柱子需要必要的清洗，請(qǐng)用戶參考柱子的說明書。
（4） 保存 長時(shí)間不使用柱子時(shí)需要合適的試劑進(jìn)行保存，請(qǐng)參考柱子的說明書。

4． 樣品的注入方式及進(jìn)樣量
（1）注入方式 在INJ位置將進(jìn)樣針插入，然后再將手柄扳到Load位，在Load位時(shí)將樣品勻速推入定量環(huán)，在從Load位扳到INJ位置即完成進(jìn)樣過程。
（2）進(jìn)樣量 對(duì)于20微升定量環(huán)，進(jìn)樣量20微升以下，5微升以上可用微量注射針進(jìn)樣（看刻度）。5微升以下可能回會(huì)造成樣品重復(fù)性變差。20 微升以上（利用定量環(huán)）建議用戶注射量為定量環(huán)的3倍以上，即大于60微升。
以上建議主要是減少進(jìn)樣誤差，提高重復(fù)性。

5． 檢測器的背壓及各種檢測池的耐壓
（1）紫外檢測器 耐壓< 30kg/cm2f
（2）檢測器熒光 耐壓< 30kg/cm2f
（3）示差檢測器 耐壓< 30kg/cm2f
檢測器后面加一些背壓主要目的是防止氣泡滯留在檢測器中。

二、液相色譜的常見故障及排除方式
1、        關(guān)于吸濾過濾器堵塞
現(xiàn)象： 塞吸現(xiàn)象、管路中不斷產(chǎn)生氣泡
處理方式：將吸濾頭1從溶劑管中拔出，放在正己烷
或稀硝酸（一般<10%）中超聲清洗。
2、        在線過濾器堵
現(xiàn)象： 不連接柱子及管路、混合器（松開泵進(jìn)混合器或柱子的管路接頭），設(shè)定泵流速為1ml/min，泵壓力大于0.3MPa，說明在線過濾器堵。
處理方式： 一般建議用戶更換新的過濾器，儀器型號(hào)：LC-10ADVP, LC-10ATVP, LC-20A，LC-20AD, LC-10AT, LC-8A, LC-6AD等可以將在線過濾器拆下，用稀硝酸（濃度小于10%），進(jìn)行超聲清洗。

3、        壓力波動(dòng)的原因及處理方法
產(chǎn)生波動(dòng)的原因： 有氣泡
密封圈有磨損，產(chǎn)生微量的泄液
進(jìn)口單向閥中有異物（較常見）
在線過濾器，管路，柱子進(jìn)口處有鹽析出或雜物

處理方法： 流動(dòng)相進(jìn)行脫氣，排除流路中的氣泡
更換密封圈
清洗進(jìn)出口單向閥，將單向閥置于燒杯中，用異丙醇進(jìn)行超聲清洗
檢查并清洗過濾器及流路

4、        混合器堵及解決方法
雙泵高壓梯度系統(tǒng)有高壓混合器，長時(shí)間使用后會(huì)產(chǎn)生不同程度的內(nèi)部過濾器堵。
處理方法：
（1）先把混合器的預(yù)混合腔整體拆下，再拆下1號(hào)和2號(hào)處。
（2）建議用戶不可拆開2號(hào)和3號(hào)之間的連接。
（3）取出混合器內(nèi)部的過濾器5-1。
（4）將過濾器置于稀硝酸中進(jìn)行超聲清洗。
5、引起柱壓升高的原因
色譜柱長時(shí)間使用后用戶發(fā)現(xiàn)柱壓比以往要高出許多，造成此情況可能由以下幾個(gè)因素引起。
（1）        在線過濾器堵。
（2）        高壓混合器堵。
（3）        進(jìn)樣器堵。
（4）        流路中部分細(xì)管堵。
（5）        流通池堵
（6）        柱子內(nèi)部吸附樣品產(chǎn)生堵
確認(rèn)發(fā)法：進(jìn)行分段檢測，確認(rèn)的確是柱子壓力高還是以上5點(diǎn)原因中某個(gè)引起的。
6、進(jìn)樣峰分叉的原因
A）        流路及柱子等沒有做任何改變的情況下，分析樣品時(shí)，被檢測峰產(chǎn)生分叉，則說明保護(hù)柱或分析柱柱效下降，需再生保護(hù)柱或分析柱。
B）        柱的出口到檢測池的管路偏長或管路內(nèi)徑寬所致（常用內(nèi)徑0.3mm以下）,導(dǎo)致樣品擴(kuò)散,造成峰分叉。
7、        什么情況下需更換D2 Lamp
A）        在SPD-10A, SPD-10Avp,SPD-20A上查看參比池的能量，若能量值（REF EN ）偏低（220nm時(shí)），一般在400以下，則被認(rèn)為需要更換氘燈。
B）        顯示D2 Lamp ERROR時(shí)，一般情況下認(rèn)為氘燈不良需更換。
C）        氘燈超過使用時(shí)間（zui多2000小時(shí)），需要更換氘燈。
8、        造成檢測池能量低的原因
A.        氘燈使用時(shí)間過長（大于2000小時(shí)），燈老化所致
B.        光路系統(tǒng)受到污染或老化
說明：檢測池能量高低以參比池為準(zhǔn)。

9、        檢測池中有氣泡如何排除
1一般情況下，很小的氣泡會(huì)停留在檢測池中，所以需要在池管路出口1處加一個(gè)背壓管，池中氣泡不易在池中產(chǎn)生。（加背壓：出口處加上一段阻尼管增加壓力）
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10、        如何清洗流通池
一般情況下，請(qǐng)用戶不要將池拆散，而是用儀器附帶的工具進(jìn)行清洗。 常用流程：水-----甲醇-----異丙醇-----甲醇，或再用稀硝酸沖洗池流路。

11、        基線漂移，噪音增大的原因。
1、        所用試劑不純
2、        整個(gè)流路系統(tǒng)不干凈
3、        流動(dòng)池污染
4、        氘燈使用時(shí)間過長
5、        電壓不穩(wěn)，或者有環(huán)境干擾
6、        柱子污染等因素

12、        梯度洗脫時(shí)可能產(chǎn)生的干擾峰
在進(jìn)行梯度洗脫時(shí)，由于溶劑的變化，導(dǎo)致吸光度背景值的該改變。所以會(huì)產(chǎn)生基線上下波動(dòng)，這是正?，F(xiàn)象。由于不斷的洗脫。特別是水及無機(jī)鹽混合的流路，流過柱子后部分雜質(zhì)被柱子吸附，隨著體系洗脫液極性的變化，以及在不同的檢測波長下，某些成分被檢測，導(dǎo)致在沒有進(jìn)樣情況下，基線上出現(xiàn)峰，即被認(rèn)為干擾峰。

13、        ODS柱的再生
ODS柱子使用一段時(shí)間后可能會(huì)導(dǎo)致柱效下降，此時(shí)需要對(duì)柱子進(jìn)行再生，提高柱效。
1.        甲醇沖洗半小時(shí)
2.        三氯甲烷沖洗十分鐘
3.        異丙醇沖洗十分鐘
4.        三氯甲烷沖洗十分鐘
5.        甲醇沖洗半小時(shí)
說明：柱使用時(shí)間的長短與被分離的樣品有很大的關(guān)聯(lián)，所以碰到像生物樣品、血制品、發(fā)酵產(chǎn)品等中均含有不同程度的蛋白質(zhì)及大分子量的組分，柱子很容易損壞，柱效易下降。這種情況下用以上方式進(jìn)行再生幾乎沒有明顯的改變。